生物样本中RNA的稳定处理
为了确保基因表达分析的精确性,所分析的RNA应能够准确地反映出其在生物样本中的体内表达情况。但实际在样本的操作和RNA的分离过程中,RNA很容易发生改变而使情况变得复杂。
生物样本一经提取,其中的RNA即变得极不稳定。期间所发生的人为影响主要分成两种。基因的下调和RNA的酶促降解会导致mRNA特异性或非特异地发生人为降低。同时在操作和加工样本的过程中,某些基因会被诱导表达。这两种效应的综合可能在检出的转录谱与体内真实情况之间造成偏差。
对RNA表达谱进行即刻的稳定化处理是精确基因表达分析中的首要事项。通常情况下,用于RNA分析的样本被迅速置于液氮中冷冻,在进一步处理之前需要一直储存于–80°C下。产品供应商也提供了一些稳定处理试剂,作为替代方法对生物样本中的RNA进行稳定化处理。这些供应商一般会提供集成化的样本处理溶液(套装),其中包括容器,稳定处理试剂及制备试剂盒。